无菌室常用的灭菌方法
高压蒸汽灭菌:为湿热灭菌方法的一种,是微生物培养中*重要的灭菌方法,这种灭菌方法是基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去,而聚集在密封的容器中,在密闭的情况下,随着水的煮沸,蒸汽压力升高,温度也相应增高。高压蒸汽室z有效的灭菌方法,能迅速地达到完全彻底灭菌,一般在15磅/英寸2压力下,15-30分钟,所有微生物包括芽孢在内都可杀死。它适用于对一般培养基玻璃器皿的灭菌。
干热灭菌:微生物培养中常用的干热灭菌是指热空气灭菌,一般在电烘箱中进行,干热灭菌所需温度较湿热灭菌高,时间也较湿热灭菌长,这是因为蛋白质在干燥无水的情况下不容易凝固,一般须在160℃左右保持恒温3-4小时,方能达到灭菌的目的。干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌,凡带有橡胶的物品和培养基,都不能进行干热灭菌。
间歇灭菌:各种微生物的营养体在100℃温度下半小时即可被杀死,而其芽孢和孢子在这种条件下缺不会失去生活力。间歇灭菌就是根据这一原理进行的。间歇灭菌的方法室100℃、30分钟杀死培养基内杂菌的营养体,然后将这种含有芽孢和孢子的培养基在温箱内或室温下放置24下手,使芽孢和孢子萌发成为营养体,这时再以100℃处理半小时,再放置24小时。
无菌室常用的灭菌方法,紫外线灭菌:紫外线杀菌力z强的是波长2650-2660A的部分。无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌。无菌室和缓冲间的照射时间为20-50分钟,接种箱照射10-15分钟即可。