PCR基因扩增设计与装修要点分析

  PCR是基因扩增实验室的简称，目前，PCR实验室没有关于设计与建设的国家标准规范，比较详细的官方文件是推荐性标准《检验检测实验室设计与建设技术要求》、卫生部办公厅的红头文件《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》通知，其中的重点都是关于如何管理PCR基因扩增实验室，对于具体如何设计与建设基因扩增实验室的描述比较少，比如：双走廊的结构的PCR公共走廊、独立缓冲间室内压力确定，四个功能区具体压力应为多少，也没有典型布局图供参考，许多从业者感觉具体操作的时候感觉比较迷茫。这里我们和大家分享基因扩增实验室的建设经验供参考：
  一、PCR的公共走廊应为微正压，人流应单向朝着产物分析区。设计与建设时可采用一侧门只能进、另一侧门只能出的方式实现。
  二、关于独立缓冲间压力。有些从业者认为独立缓冲间应为正压，认为正压起到截断作用，才能确保气流不会交叉污染。我们认为这个观点是错误的，因为正压房间的气流向两侧房间分流，缓冲间存在污染的可能，正压并不可靠。负压的缓冲间可让两侧房间汇流排出室外，即使缓冲间或公共走廊有污染，也因为合流排出室外、避免分流到对面房间而造成交叉污染。
  三、关于是否需要空气洁净工艺处理的争论。 这个争议很久了，我们认为日常的卫生清洁、紫外灭菌已经足够。现代成熟的PCR扩增技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且是封闭式操作的，气溶胶污染大大降低，与常规PCR相比，它已经有效解决PCR污染问题、自动化程度高，目的片段的浓度要远远大于环境里随机片段的浓度. 所以环境并不需要特别的洁净过滤处理，关键措施是避免与其它功能间交叉污染。
  四、关于开窗问题。这个争论其实有点纠结，全自动的荧光定量PCR是封闭运行的，气溶胶污染大大降低，密闭房间的污染风险很小，但是也并非万无一失，所以实验室整体装修的外窗还是建议不要做固定密闭窗，这样一旦污染，*简单的做法就是开启外窗通风，稀释污染物，同时紫外灯长时间照射、换掉全部耗材、并用次氯酸钠等全面消毒擦洗。